微生物检验一般包括三个步骤，分别是，第一步涂片检验、第二步是根据病原菌生长形态和初步鉴定结果进行初步鉴定和药敏的预报，第三步是最终的鉴定和药敏报告。涂片报告通常需要一到两个小时即可完成。第二步的预报需要在菌落生长后才可以进行，通常需要24-48小时，其中一些生长比较缓慢的真菌可能需要更长的时间。第三步的最终鉴定和药敏报告则需要48-72小时，甚至更长时间。由于鉴定和药敏结果都需要较长的时间，因此涂片检验对疾病的诊治可起到非常重要而关键的作用。那涂片检验能告诉我们什么信息呢？今天我们一起来探讨一下。

附常见标本涂片检验规则：

一关于痰液标本涂片的一些标准：

1.痰液标本质量：多形核白细胞(WBCs)25个/LP，鳞状上皮细胞(SECs)10个/LP[或WBCs：SECs=10：1]，为可接受标本，适合进行细菌培养鉴定和药敏试验。当SECs10个/LP时，提示痰标本质量较差，痰标本可能被唾液污染；当SECs25个/LP时，痰标本被唾液正常菌群污染，不能用于进行细菌培养和鉴定。

2.痰液中提示感染的“物质”：

大量多形核白细胞、多形核白细胞有胞内菌、弹性蛋白或胶原纤维、库斯曼螺旋体、坏死的白细胞：“感染”；

夏科来登结晶：过敏性肺曲霉菌病或寄生虫感染

3.可疑感染病原菌的提示：大量多WBCs存在，且WBCs胞内/外见以下形态细菌；

①革兰阳性球菌成对或呈短链排列(矛头状)，有荚膜，提示可能为肺炎链球菌感染；

②革兰阳性球菌，成串或者成堆排列，提示可能为金黄色葡萄球菌感染；

③革兰阴性双球菌，提示可能为卡他莫拉菌感染；

④革兰阴性小球杆菌，提示可能为流感嗜血杆菌感染；

4.吸入性肺炎：大量多WBCs存在，伴大量革兰阴性小杆菌、球菌，革兰阳性链球菌及其他形态细菌存在。

5.关于真菌：微生物学标准中的痰、支气管肺泡灌洗液等标本只适用于霉菌，而非念珠菌，念珠菌多为口腔正常菌。对于免疫力正常人群，即使下呼吸道分离到念珠菌，除非有组织病理学证据或其他血清学证据，否则难以判段为致病菌。

参考资料：

《下呼吸道感染细菌培养操作指南(WS/T-)》

《细菌与真菌涂片镜检和培养结果报告规范专家共识》

《念珠菌病诊断和治疗专家共识》

《侵袭性真菌病临床实验室诊断操作指南(WS/T-)》

二关于中段尿标本涂片的一些标准：

中段尿液标本涂片革兰染色显微镜检查主要观察有无白细胞、细菌和扁平上皮细胞，主要用于筛查有较高的菌落计数患者、大部分无症状患者和患有肾盂肾炎的患者。

1.中段尿标本质量：①新鲜尿液离心后白细胞计数5个/HPF,提示可能存在感染。②白细胞酯酶阳性。③尿液中出现大量扁平上皮细胞常提示标本中的细菌可能为正常菌群污染。

2.中段尿中提示感染的标志：

白细胞(5个/HPF)、中性粒细胞(10个/mm3)、白细胞酯酶、细菌管型。

3.中段尿中致病菌的认定：

①≥3种细菌常提示标本来自导管尿或受白带/粪便的污染。

②镜检发现混合的粪便细菌形态提示胃肠道瘘管进入膀胱。

③尿液中出现大量扁平上皮细胞常提示标本中的细菌可能为正常菌群污染。

④无症状患者尿液未发现白细胞，发现两种细菌提示为定值菌或者为污染。

⑤清洁中段尿培养菌落数1×/ml，认可为致病菌(未离心中段尿标本，油镜平均每观察到1个菌体，相当于-CFU/mL)

参考资料：

《尿路感染临床实验室诊断(WS/T-)》

《临床微生物手册（第1）

《泌尿道感染诊治循证指南（）》

《细菌与真菌涂片镜检和培养结果报告规范专家共识》

三关于分泌物标本涂片的一些标准：

关于分泌物涂片观察内容：多形核粒细胞、细菌形态、细胞内细菌、细胞坏死及坏死形成的弹性纤维蛋白等。

1.伤口分泌物标本质量：伤口分泌物标本质量主要通过多形核粒细胞和鳞状上皮细胞的相对量来评价。过多的鳞状上皮细胞提示标本受皮肤菌群的污染，不适合用于病原菌培养。

2.男性尿道分泌物：WBCs≥5个/oid为提示存在泌尿道炎症。女性宫颈粘液脓性分泌物：WBCs≥10个/oid为提示存在生殖道炎症。

参考资料：

《临床微生物手册（第11版）》

《中国卫生部性病诊疗规范和性病治疗推荐方案(年８月)》