白癜风治疗目标 http://www.zbxusheng.com/Special/zyzpfbdf/
近年来,感染性疾病的新发突发不断威胁人类健康,新型冠状病毒肺炎、中东呼吸综合征、流感、埃博拉、寨卡病毒、黄热病、裂谷热等传染性疾病的传播,成为全球公共卫生问题。随着城市化的发展、全球贸易往来的增加,环境改变加剧自然疫源性传染病的传播风险,感染性疾病的预防控制刻不容缓。因此,开展传染病的即时快速检测,对于感染性疾病的防控工作具有重大意义。
年美国CLSI提出即时检测(point-of-caretesting,POCT)的概念,年美国临床化学学会(AmericanAssociationforClinicalChemistry,AACC)年会展览展出了一些能够快捷移动、操作简便、结果准确可靠的技术和设备,即"在靠近患者的地方在极短的时间内以混合型实验室的形式获得准确测量结果的装置与仪器",即POCT设备。POCT也可以被解释为靠近患者的床旁检测,医生、护士甚至患者都可以操作,快速的现场检测避免了标本采集送检的过多流程,缩短了发现传染病的时间,促进药物早期合理使用,从而实现传染病的早期防治目标。
一、POCT的发展POCT具有操作简便、便携、智能化等优点,近年来作为体外诊断技术发展迅速,被应用在多个学科的检测项目中。在感染性疾病检测中,POCT也已经成为十分重要的检测技术,检测项目广泛,除了常见的CRP、降钙素原、白介素-6等细胞因子的快速检测,还包括各种细菌、病毒等多种病原微生物的检测。
随着生物医学技术的发展,干化学技术、免疫层析技术、色谱、光谱、生物传感器及光电分析技术、计算机芯片技术、自动化技术等的应用以及免疫和分子生物技术的引进,POCT呈现出自动化和简单化的趋势,在临床和社区医疗中发挥着重要的作用。POCT所应用的技术原理正在从传统的干化学技术、免疫层析技术等向生物传感技术、微流控芯片技术等发展。
二、POCT技术在感染性疾病诊断的应用(一)免疫学检测
POCT应用的免疫学技术主要是胶体金免疫层析技术、免疫荧光技术、(电)化学技术、乳胶标记技术等,主要应用于病原体的抗原和抗体检测,病原体刺激机体产生细胞因子的检测,快速时相反应蛋白检测和代谢产物毒素检测等。
1.胶体金技术在病原体抗原抗体检测中的应用:
目前在临床检测中最常见的是胶体金检测。胶体金免疫层析技术是以免疫层析技术、胶体金标记技术相结合的一种新型免疫学技术,其特点是单份测定、简单快速,几分钟即可用肉眼观察结果。该方法的优点是简单、快速、及时,缺点是灵敏度低,容易漏检。胶体金法能够直接检测传染病病原的抗原和抗体。
临床应用较广的POCT抗原检测包括:甲乙型流感抗原、呼吸道合胞病毒抗原(鼻咽部分泌物)、军团菌抗原(尿)、隐球菌抗原、恶性疟原虫循环抗原和间日疟原虫抗原、班氏丝虫抗原及利什曼原虫抗原的检测等。
POCT抗体检测包括术前筛查项目[艾滋病病毒抗体(1+2)、梅毒螺旋体抗体、乙肝五项、丙肝抗体、乙型肝炎病毒表面抗原],肾综合征出血热病毒抗体、乙型脑炎血清特异性抗体、单纯疱疹病毒抗体、人巨细胞病毒IgM抗体、风疹病毒抗体、轮状病毒抗体(粪便)、登革热病毒抗体、淋球菌(分泌物)和泌尿生殖系沙眼衣原体(分泌物)、沙门菌血清抗体、抗幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体等,还能够检测弓形虫抗体、包虫体抗体、血吸虫抗体、人囊虫病等。
2.胶体金法在感染性疾病炎性指标中的应用:
急性感染时胶体金法检测CRP、降钙素原、血清淀粉样蛋白A(serumamyloidAprotein,SAA)、白介素-6等。在诊断细菌或病毒感染时更加简便快速,能够满足临床即时检测需求。SAA是细菌和病毒感染密切相关的标志物,其在判断感染特别是病毒感染方面明显优于CRP和WBC,可作为早期感染的判别标志物。病毒感染后,SAA上升的幅度与病毒种类有关,SAA联合CRP和WBC检测能够提高细菌或病毒感染诊断的可靠性。
3.其他POCT技术在感染性疾病免疫学检测中的应用:
免疫荧光技术分为直接免疫荧光和间接免疫荧光技术两类,主要应用于呼吸道病原体的抗原和抗体检测,其优点是直接在荧光显微镜下看到病原体,缺点是检测时间长,需要荧光显微镜,要求人员有一定的形态学辨识能力。
电化学技术应用于POCT病原体检测,优点是检测病原体项目多(弓形虫抗体、风疹病毒抗体、巨细胞病毒抗体、单纯疱疹病毒抗体等),灵敏度高。缺点是特殊人群假阳性率高(孕妇)。
乳胶标记技术主要应用于病原体的抗原和抗体检测,例如狂犬病、日本乙型脑炎、隐球菌抗原等,其优点是快速,缺点是假阳性率高,容易发生非特异反应。
(二)病原体核酸检测
1.微流控芯片技术:
年微型全分析系统(miniaturizedtotalanalysissystem,μTAS)的概念提出之后,微流控芯片是μTAS中当前最活跃的领域和发展前沿,它将分析实验室功能转移到芯片上,即芯片实验室(lab-on-a-chip,LOC)。
微流控芯片技术可将化学和生物等领域中涉及的样品制备、反应、分析、检测等基本操作单元集成到一块几平方厘米的芯上,具有试剂样品用量少、分析速度快的优点,用于床旁检验已受到广泛