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选择性必修三P82讲到:
在老教材上,对目的基因是否导入受体细胞用的方法是:
目的基因是否导入受体细胞,由DNA分子杂交变成了PCR等技术……,难道DNA分子杂交技术不可以?如何解释?
升级了,明显升级了,翻看基因工程发展历程,从年艾弗里等人通过肺炎链球菌转化实验第一次证明了DNA可以在同种生物的不同个体之间转移,到今天,差不多经历了88年的时间,基因工程技术突飞猛进。人教版老教材年第一版至今,生物技术更是变化最快的20年。所以新教材对应的生物技术知识做了很多的更新。比如目的基因的获取不就删除了基因文库和化学方法直接合成吗?当然不是这个方法不对,是在新的技术下,这种方法用得少了。而PCR技术更加成熟可靠,用途更广。
PCR技术检测目的基因是否导入有以下证据:
011.课后练习拓展应用第1题可以作为证据。
教参解释:外源基因插入基因组中可能为单位点插入,或者同一染色体多位点插入,或者不同染色体多位点插入。大多数情况下,插入的位点难以做到定点插人;插入的拷贝数也是随机的。因此,外源基因在转基因植物中的遗传是很复杂的。
从这段话中我们读出:目的基因很难进入受体细胞,即便进入了,也非常少。所以想用探针直接探出受体细胞中的DNA是否有目的基因片段,那真是大海捞针。解决办法:想法让目的基因增多,所以用PCR先将目的基因进行扩增,然后再用DNA分子杂交。
022.这次教材新增了DNA片段的扩增及电泳鉴定实验,这可以作为解释的证据。
在PCR扩增鉴定中,引物设计是关键之一,引物可以是外源插入基因的特异序列,即目的基因片段两端;可以是目的基因插入位点的载体上的序列,即目的基因两侧;还可以是载体多克隆位点两侧的序列;甚至是由插入的载体序列和目的基因序列共同组成。如果采用的是插入基因特异引物,提取受体细胞的基因组DNA进行扩增,就能扩增出目的基因的特异产物带,直接筛选出目的基因克隆,否则没有扩增产物出现。利用扩增后的片段进行电泳,就可以鉴定了。033.其实,PCR以其高灵敏度、高效率扩增目标DNA的特点,广泛应用于生命科学、医疗诊断、法医检测、食品卫生和环境检测等方面。
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