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目录
一、阴道炎现状
二、阴道微生态
三、阴道炎检测常用的方法学
（一）悬滴镜检法
（二）阴道生化标志物的检测法
（三）涂片染色法
（四）培养法
（五）免疫学方法
四、常用阴道生化标志物的检测方法与意义
（一）pH测定
（二）阴道分泌物酶活性测定
（三）细菌代谢产物的测定
五、丽拓阴道炎联合检测试剂盒检测指标的检测原理及临床意义
（一）N-乙酰基-β-氨基半乳糖苷酶（NAG）活力检测
（二）唾液酸酶（SNA）活力检测
（三）白细胞酯酶（LE）活力检测
（四）β-葡萄糖醛酸苷酶（β-glucuronidase，GUS）活力检测
（五）过氧化氢（H2O2）浓度检测
（六）pH值
六、LTS—V阴道炎检测系统的产品特点及技术优势
七、LTS—V阴道炎检测系统检测技术的发展前景与市场分析
（一）发展前景
（二）市场调查分析
（三）可行性报告
八、参考文献
一、阴道炎现状
阴道炎是阴道粘膜及粘膜下结缔组织的炎症，是妇科门诊常见的疾病，临床上以白带的性状发生改变以及外阴瘙痒灼痛为主要临床特点。阴道炎的主要发病原因为阴道的微生态环境发生改变，致病微生物进居并大量增殖，导致阴道正常菌群（产过氧化氢的乳酸杆菌）减少、阴道细胞变性坏死并发生炎症改变。常见的阴道炎有细菌性阴道炎（阴道加德纳菌、类杆菌等厌氧菌侵入）、霉菌性阴道炎（念珠菌侵入）和滴虫性阴道炎（滴虫侵入）等。其中细菌性阴道炎和霉菌性阴道炎的患病率较高，且不同人群患病率存在明显差异。BV在美国非选择人群中的患病率为10%～20%,但在性病门诊就诊的妇女中高达33%～64%,妇科门诊为15%～23%,产科门诊寻求终止妊娠的妇女中患病率为28%,最近的一项国外调查结果显示妊娠妇女患病率为7%。国内最早调查其患病率在成年妇女中为18.92%,在性罪错妇女中为36.73%,在有阴道异常分泌物的患者中为43.33%。霉菌性阴道炎的检测方法不统一，检出率未有明确数据。
阴道炎的防治中存在发病率高、复发率高两个主要问题。阴道感染复发率高的主要原因：治疗方案单一，消炎杀菌为主很少考虑生态治疗；传统的阴道炎治愈标准：①阴道炎的临床症状消失；②阴道炎的体征消失；③实验室检查病原体消失。由于标准中缺少了能够反映阴道微生态平衡的指标，治愈的病例在半年内的复发率可达50%，如果阴道微生态平衡未恢复正常，复发的可能性更大。必须将反映阴道微生态的指标列入阴道炎治愈标准中。
二、阴道微生态
阴道微生态失调是阴道感染的罪魁祸首，也是导致阴道炎难治愈、易复发的根本原因。
阴道微生态平衡的定义：女性生殖道微生态体系由阴道内的微生态菌群、机体内分泌调节功能和解剖结构共同组成。妇女阴道内存在多种正常微生物群落，它们与宿主、环境相互制约、相互协调、保持阴道微生态体系的动态平衡。
健康妇女阴道中寄生着50多种微生物，包括:乳杆菌、双歧杆菌、拟杆菌、肠球菌、表皮葡萄球菌、链球菌、棒状杆菌、大肠杆菌、韦荣球菌、消化链球菌、加德纳菌，以及除了细菌以外的原虫、病毒、支原体和白假丝酵母菌等，其中以专性和兼性厌氧菌为主。正常状态下，阴道内厌氧菌与需氧菌的比例为5:1，二者处于动态平衡状态。
健康育龄女性阴道内占优势地位的是能产生乳酸和H2O2的乳杆菌，它对维持阴道微生态的健康，预防阴道感染的发生起到了重要的作用，每克阴道分泌物含有~CFU（菌落形成单位）乳杆菌。
（1）阴道微生态失调与念珠菌阴道炎
念珠菌外阴阴道炎（习称霉菌阴道炎）的发病机理：菌群失调及阴道局部微生态平衡遭破坏，正常阴道内的细菌丛能抗念珠菌生长，预防其侵入粘膜，特别是寄生的厌氧菌和兼性厌氧的乳杆菌对阴道上皮细胞有保护功能。在高危因素影响下如性传播、口腔直肠的交互感染、全身免疫系统及阴道局部环境的改变、糖尿病、口服避孕药的使用、妊娠及抗生素的应用等可改变阴道菌群比例。阴道微生态失调，易使念珠菌得以繁殖而感染，若不从根本上调节阴道局部的微生态平衡，则抗真菌药物治疗后易复发。
（2）阴道微生态失调与滴虫性阴道炎
乳杆菌是健康妇女阴道正常菌群中的优势菌，在维持阴道微生态平衡中起着重要作用。正常情况下，健康妇女的阴道环境因乳杆菌通过其产生的酸性微环境的作用而保持酸性(pH值在3.8~4.5之间)，可抑制滴虫或其它细菌生长繁殖。然而，受多种因素影响，目前有较多妇女阴道微生态平衡受到严重破坏，阴道乳杆菌明显减少甚至没有，致使其生物拮抗作用下降，导致滴虫性阴道炎、宫颈炎等妇科疾病的发生。
（3）阴道微生态失调与BV
细菌性阴道病(bacterialvaginosis，BV)是阴道微生态环境内菌群与分泌物生化性质变化引起的常见阴道疾病，表现为正常阴道乳杆菌数量减少而代之以阴道加德纳菌等兼性厌氧、厌氧菌数量增加并伴随分泌物pH值升高等阴道内生态平衡系统改变而引起的疾病。
LTS-V阴道炎检测系统就是基于阴道微生态平衡理念研制，可全面检测阴道微生态，从根本上查找病因，是阴道微生态平衡检测专家。
三、阴道炎检测常用的检测方法学
（一）.悬滴镜检法：
悬滴法是检查阴道毛滴虫最简单方法，阳性率可达80%-90%。将检体涂在载玻片上，再加1滴生理盐水后加盖玻片，显微镜下镜检，可见原虫鞭毛波动膜活动。在生理盐水中加5%的中性红，滴虫不能死亡，并不着色，而周围形成粉红色，对白色的原虫易于认出，或用倍吖啶橙液1滴滴入新鲜标本上，用荧光显微镜观察，可见虫体带有淡黄绿色的荧光，容易观察，直接镜检法检出率较高。
（二）.阴道生化标志物的检测方法
阴道感染时，由于致病菌的入侵与大量增殖，导致正常菌群改变、阴道细胞变性坏死，阴道分泌物的化学性质会发生变化，这种变化主要表现为“三高一低”，即pH升高，致病菌分泌的胞外酶和代谢产物增高，阴道内白细胞、吞噬细胞等阴道细胞被细菌破坏释出的白细胞酯酶增高，以及正常菌群的酶与代谢产物减低等，可以通过化学酶触的显色反映来提示阴道各种感染。据统计，日前用于研究和临床诊断的阴道生化标志物已达多种，按测定的临床意义，大致分为阴道微生态的评价、病原微生物进居及增殖水平的评价、阴道宿主细胞反应水平的评价三类；按测定项目的性质，大致分为阴道分泌物的酶活性测定、胺类测定、脂肪酸及其比例测定、H2O2测定、pH测定等。
（三）.涂片染色法
将分泌物涂在玻片上，待自然干燥后可用不同染液染色，如革兰染色，瑞特染色，姬姆萨染色，PAS染色和利什曼染色。这种方法不仅可看到滴虫的形状和内容，而且能同时看到阴道内存在的其他微生物。也可用吖啶橙染色，荧光显微镜检查。
（四）.培养法
将阴道分泌物或尿道分泌物加入培养基内，置37℃温箱中培养48小时，每隔72小时接种1次，取培养混匀液1滴涂片，染色镜检。
（五）.免疫学方法
检测阴道毛滴虫特定的抗原。常用的免疫学方法有荧光抗体检查法，ELISA法，胶乳凝集法等，其阳性率较涂片法高，但临床一般不采用免疫学方法检查。
四、常用阴道生化标志物的检测方法与意义
健康育龄妇女阴道分泌物pH为3.8--4.5，由阴道壁漏出液、巴氏腺和Skene腺泌液、宫颈粘液、子宫内膜和输卵管泌液等液体和阴道脱落细胞、微生物及其酶、代谢产物组成，当阴道的微生态发生改变，致病菌进居并大量增殖，导致阴道发生炎症改变时，阴道分泌物的成份和性质发生某些特定的变化，通过观察分泌物的物理性状、分析其中生化成份的改变，可对阴道感染的病因及其程度作出判断，为治疗提供客观依据，在妇科诊断学中有重要意义。
据统计，日前用于研究和临床诊断的阴道生化标志物已达多种，按测定的临床意义，大致分为阴道微生态的评价、病原微生物进居及增殖水平的评价、阴道宿主细胞反应水平的评价三类；按测定项目的性质，大致分为阴道分泌物的酶活性测定、胺类测定、脂肪酸及其比例测定、H2O2测定、pH测定等。
（一）、pH测定
阴道分泌物pH测定主要用于阴道微生态的评价，是目前普遍使用的一种妇科诊断方法，有些国家特别是BV高发地区，阴道分泌物pH测定已被列为妇科常规检验项目。临床应用证实，pH测定对BV的诊断灵敏度可达90%以上，但特异度较低，约60%；老年性阴道炎pH普遍上升，但上升幅度不大，大部分在4.5-5.0的范围，因此，一些分辨率较低的pH测定方法不适于老年性阴道炎的诊断；宫颈炎与滴虫性阴道患者除非伴有严重的菌群失调，否则阴道分泌物的pH不会有明显改变；霉菌性阴道炎阴道分泌物的pH一般4.5，滴虫性阴道炎分泌物pH一般4.9。
（二）、阴道分泌物酶活性测定
目前用于研究与临床诊断的阴道分泌物酶已有20余种，其中以唾液酸苷酶SNA、脯氨酸氨肽酶、透明质酸酶、乳酸脱氢酶LDH和白细胞酯酶LE、胱氨酰蛋白酶、门冬酰氨蛋白酶ASP最为常用。
1、LDH：LDH是阴道乳酸杆菌合成的一种胞外酶，可用于阴道微生态的评价。正常育龄妇女阴道分泌物中LDH活性一般在10U/ml以上。阴道感染时，LDH活性普遍下降，其中以老年性阴道炎、BV最为明显。临床研究证实，LDH对BV的诊断符合率为82%、对老年性阴道炎的诊断符合率为76%、对霉菌性阴道炎和滴虫性阴道炎诊断符合率较差。LDH测定主要采用甲替反应，国外已有商品试条供应，在欧美等国家应用比较普遍，在我国尚未开展此项检测。
2、透明质酸酶：透明质酸酶是一种反映损伤阴道粘膜致病微生物进居的酶，在日本，欧美等国家使用比较普遍，已有商品试条供应。透明质酸酶对各种阴道感染的预后评价很有价值，阴道分泌物中此酶活性持续升高，提示阴道粘膜损伤严重，预后不良。
3、脯氨酸氨肽酶：是近年来在BV诊断中使用较广泛的一种酶，主要用于了解阴道致病菌的进居与增殖情况，国外已有商品试纸供应。脯氨酸氨肽酶由加德纳菌、游动弯曲杆菌、普雷沃菌合成，在BV感染早期即可明显升高，急性期可超过正常上限的0倍。临床研究证实，脯氨酸氨肽酶对BV诊断的特异度和敏感度都在80%以上，对老年性阴道炎诊断的灵敏度可达95%，特异度较低约70%，对滴虫性阴道炎和霉菌性阴道炎的临床价值不确定。
4、SNA：SNA是加德纳菌、普雷沃菌、厌氧菌、游动弯曲杆菌合成的一种胞外酶，其活性与这些细菌的数量成正比，是目前临床使用最为普遍的一种妇科检查项目，可供选择的商品试剂盒较多，仅国内即有30余家厂商生产该产品。SNA的诊断可信度与采用的方法有关。该项检查的发明者Hillier认为，阴道分泌物中SNA活性对BV诊断的临界值应为7U/ml，但现有的商品试剂盒大部分没按此标准设定其技术参数，造成了不同试剂盒诊断的特异度、灵敏度差别很大，医院使用某公司BVBlue产品，检出的阳性率达30%，更换另一产品后的阳性率仅为8%。考虑到由于约20%正常育龄妇女阴道分泌物中可分离出BV致病菌，以及我国尚未制订该试剂盒诊断临界值、最低检限等技术标准等情况，临床不宜用SNA单项指标诊断BV。SNA的测定方法大部采用靛青反应，即利用唾液酸苷酶分解吲哚唾液酸苷盐产生的吲哚基在氧的作用下产生兰色的靛青反应，有些商品试剂盒为提高灵敏度，在反应系统中增加了重氮试剂，由于使用的重氮盐不同，可呈现紫色、红色、棕色或蓝色反应。BVSet三项试剂盒中，SNA的呈色临界值为7U/ml，育龄妇女阳性检出率约15%，对BV诊断的特异度可达90%，灵敏度为91%，临床可参考选用。
5、LE：LE是阴道宿主细胞反应酶标志物，也是妇科使用较为普遍的一项诊断技术。该指标最早用于泌尿系感染的诊断，上世纪80年代，人们发现阴道支原体感染时，阴道分泌物中LE活性明显升高，始将其用于女性生殖道感染的诊断，临床与实验研究证实，LE检测衣原体和淋球菌的敏感读为54-%97%、特异度为36%-95%，对淋病、宫颈炎等有一定价值。LE存在于粒细胞的胞浆内，只有当粒细胞被细菌产生的毒素分解后才能释放出来，因此，LE活性与阴道分泌物中的脓球成正比，与结构完整的白细胞数量不一定呈比例关系，此点应引起临床的注意。BVSet三项试剂盒中LE呈色临界值为10U/ml，大约相当于15/HP已破坏的白细胞，阳性结果提示受检者阴道内感染了能合成分解阴道细胞内毒素的病原体，用于无症状衣原体感染的初筛，亦可用于宫颈炎的早期诊断。
6、胱氨酰蛋白酶：胱氨酰蛋白酶为原虫合成分泌的一种胞外酶，不同原虫合成的蛋白酶的最适pH、底物专一性不同。上世纪80年代美国人首先分离出阴道毛滴虫胱氨酰蛋白酶，并建立了酶活性测定方法，年第一个商品胱氨酰蛋白酶试条问世，现已在欧美和日本广泛使用。临床应用证实，胱氨酰蛋白酶对滴虫性阴道炎的诊断特异度为92%，灵敏度为88%，与培养法的符合率为86-93%，准确度超过免疫凝集反应。我国此类技术的商品试剂盒正在研制中，预计年投放市场。
7、ASP：ASP是念珠菌合成分泌的一种胞外酶，它可水解胶原和糖蛋白，造成阴道粘膜损伤。ASP的检测技术比较复杂，至年始有较简易的商品试剂盒问世，在欧美等地已在临床广泛使用。临床应用证明，在所有念珠菌急性感染早期患者的阴道分泌物中，都可检测到ASP，亚急性期的检出率为80%左右，与培养法的符合率为84-96%，对霉菌性阴道炎有较高的诊断价值。ASP的特异性受白细胞数量的影响，严重宫颈糜烂患者会出现假阴性。我国此类技术的商品试剂盒正在研制之中，预计年投放市场。
（三）细菌代谢产物的测定
目前，用于实验室研究和临床诊断的阴道分泌物细菌代谢产物已达30余种，其中较常用的是胺类、H2O2和短链脂肪酸三类。
H2O2是阴道乳酸杆菌产生的一种重要杀菌物质，对防止致病菌的定居、增殖，维持阴道微生态具有重要作用。一般情况下，阴道分泌物中H2O2浓度与乳酸杆菌的数量成正比，最低浓度不小于2umol/l。临床与实验研究证实，以产H2O2乳酸菌为阴道优势菌群的人，患各种生殖道感染的机会远远低于以不产H2O2乳酸菌为优势菌群的人群。除评价阴道生态状况以外，阴道分泌物中H2O2浓度还被用于生殖道感染的预后与疗效评价。Hawes发现，阴道分泌物中H2O2试验阴性的人，BV的复发率是H2O2试验阳性者的10-20倍。由于这些特点，阴道分泌物中H2O2浓度被认定为一种很有前途的阴道的生化标志物。
五、阴道炎联合检测试剂盒的检测指标的检测原理及临床意义
（一）、N-乙酰基-β-氨基半乳糖苷酶（NAG）活力检测
N-乙酰基-β-氨基半乳糖苷酶能水解对（邻）硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基己糖苷反应，释放出的对（或邻）硝基苯在碱性条件下显黄色，颜色的深浅与β-氨基半乳糖苷酶含量呈正比。
N-乙酰基-β-氨基半乳糖苷酶是白色念珠菌、阴道毛滴虫分泌的酶，正常阴道分泌物中不含此酶，只有在白色念珠菌或阴道毛滴虫感染时才能检测到此酶的存在。若β-氨基半乳糖苷酶阳性，再结合分泌物pH，即可分辨是白色念珠菌或滴虫感染。
（二）唾液酸酶（SNA）活力检测
唾液酸酶能水解5-溴-4-氯-3-吲哚神经氨酸盐，释放出无色的溴吲哚基，在有氧条件下起反应呈蓝绿色，呈色深浅与唾液酸酶含量呈正比。
唾液酸酶是加德纳菌、动弯杆菌等BV致病菌分泌的特异性酶。阳性表明有细菌性阴道病。
（三）白细胞酯酶（LE）活力检测
白细胞酯酶能水解5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸盐，释放出无色的溴吲哚基，在有氧条件下起反应呈蓝绿色，呈色深浅与白细胞酯酶含量呈正比。
白细胞酯酶为多形核白细胞释放的羧酸酯酶，在发生炎症时，多形核白细胞在病灶聚集而大量释放白细胞酯酶，细菌性及霉菌性阴道病均可见明显多形核白细胞。白细胞酯酶活性可反应阴道清洁度，辅助诊断阴道炎症状况。
（四）β-葡萄糖醛酸苷酶（β-glucuronidase，GUS）活力检测
β-葡萄糖醛酸苷酶是大肠埃希菌等需氧菌的特异性酶。β-葡萄糖醛酸苷酶能水解5-溴-4-氯-3-吲哚葡萄糖醛酸苷盐，释放出无色的溴吲哚基，遇特殊物质后起反应呈蓝色或绿色，呈色深度与β-葡萄糖醛酸苷酶活性成正比。
（五）过氧化氢（H2O2）浓度检测
在过氧化物酶存在的前提下，过氧化氢分解为产生氧，后者能使显色底物发生由无色到紫红色的颜色变化，呈色深度与H2O2浓度成正比。
过氧化氢是阴道乳酸杆菌的标志物，其浓度表示有益菌的多少，阴性指乳酸杆菌量正常；阳性指阴道环境处于病态或亚健康状态。
（六）PH值
PH值垫上指示剂底物在不同酸碱值,显示对应颜色的变化。
参考文献1、2中提示霉菌性阴道炎患者阴道分泌物PH值一般4.5，滴虫性阴道炎患者阴道分泌物PH值一般4.9。
六、LTS—V阴道炎检测系统的产品特点及技术优势
（一）产品的核心在于采用了全自动涂片盖片镜检技术
采用的是利用仿生学原理研制的全自动涂片盖片镜检技术，是指将标本滴加到载玻片上，通过机械臂自动推出盖玻片到标本上，进行盖片，再由仪器自动镜检的技术，通过镜检的自动对焦功能，使镜检图像更加清晰。
技术优势：
操作中采用的是滴加样本到载玻片上，再由仪器自动盖片的技术，且每次滴加后取样针都有一个自动冲洗的过程，不会造成交叉污染的现象；
?涂片均匀，系统自动对焦，使用的盖玻片很薄，清晰度高；
④全自动涂片盖片镜检技术所使用的载玻片和盖玻片都是一次性的，杜绝了交叉污染，透明度高。
所使用的玻片套件已获得国家发明专利
（二）镜检化学二合一：可由文献得到以下数据；
由以上表格可看出，医院常用的湿片法受经验，操作，人工判读等原因存在一定的假阴性的情况，而化学检测则是酶的活力检测。两者互补，可提高检测结果阳性率及结果判读准确性。
LTS-V结合了常规镜检和化学检测，并实现了镜检结果、化学检测结果的自动判读。使结果更准确、更直观。
（三）自动化：标本自动进样、自动传送到显微镜下、显微镜自动转换高低倍镜、自动对焦拍照、自动滴加样品于玻片及检测卡板、自动拍摄实验后检测卡板照片、自动判读检测结果、自动废弃检测卡板。
（四）实时性：实现了每批40个标本的实时监测，样本随到随检。
（五）灵活性：针对不同患者，配有单联、五联、六联检测卡，可根据需要进行选择。并设有急诊功能。
（六）准确性：采用独特的颜色识别模块，数据化判读，消除标本本身对检测结果的影响，并设计标准的空白对照模块，能实时消除标本本身对检测结果的影响确保判读结果的准确性。
（七）信息化设计自动条码扫描系统，医院的信息管理系统联网，实现了检测结果的共享及病例信息管理的标准化。
（八）智能化设计了智能化的人机对话界面，可实时显示每一个标本的检测过程，方便操作者进行有效的实时监控，并可根据临床要求对温育温度、温育时间、加样数量等参数进行设定，为阴道炎检测的临床科研、教学提供便利。
（九）速度快：仪器智能化程度高，检测速度快，批量检测时间不超过60min。
（十）平台化：可拓展白带常规以外的检测项目。
七、LTS—V阴道炎检测系统检测技术的发展前景与市场分析
（一）、发展前景
LTS-V阴道炎检测仪及其配套试剂盒采用的是阴道生化标志物技术检测，结合了常规镜检和化学检测，并实现了镜检结果、化学检测结果的自动判读。使结果更准确、更直观。
由仪器自动扫描、自动加样、自动温育、自动判读化学及物理检测结果、自动储存及打印报告，是全新一代阴道炎检测技术。此技术实现了阴道炎检测真正意义上的由传统手工操作到全自动机器智能化操作的飞跃！产品灵敏度、特异度高，阳性检出率较常规白带检测明显提高。该项技术一经推出大受好评，并获得专家认可。
LTS-V阴道炎检测仪将带来阴道白带标本检测革命性的变革，标志着阴道分泌物仪器自动检测时代的带来，将对临床妇科感染检测的标准化和信息化产生深远的影响,可以当之无愧地称为阴道微生态检测专家！
（二）市场调查分析
阴道炎感染率及复发率都极高，目前还有逐年上升的趋势，据不完全统计，一个市级妇幼保健院的阴道炎检测每月人次可以达到0以上，医院都在一万人以上，如此大的标本量，单纯手医院需要，阴道炎检测由仪器完全代替手工操作是以后发展的趋势。自此，丽拓公司全球首家推出了全自动阴道炎检测仪，医院的阴道炎检测提供便利。目前部分地区已有收费标准。
（三）可行性报告
目前河南省郑州市为65元/测试，广东省单项唾液酸酶项目收费为65元/测试等等，各省各地区收费标准各不相同，有的省份还未制定多联检测的收费项目。
LTS-V成本为每测试元，提供整个测验试过程（从取样到出报告）的所有耗材，无需人工成本，医院花费成本低。
最低收入：医院在开展全自动阴道炎检测后，一个月临床白带标本例，白带体检标本例，那么它每个月的液基项目收入为3*（收费-成本）=元。
最高收入：医院在开展自动阴道炎检测后，一个月临床白带标本00例，平均一个月白带体检标本例，每月其它临床标本例，那么它每个月的阴道炎联合检测项目收入为15*（（收费-成本）=元。
八、参考文献
[1]加拿大公众卫生署
