为进一步提升诊疗能力，近日，医院检验科成立了PCR实验室，经过充分的准备，开展了新检测项目。

超敏乙型肝炎病毒核酸定量检测应用说明

标本类型：

1.血清

2.标本采集：单独采集一管静脉血，-rpm离心20min，分离血清于1.5mlEP管中，置于-20℃冰箱保存，不易反复冻融。同其它血液采集，但不要用肝素管，溶血标本需重新采集。

检测时间：一周一次，每周五出报告

临床应用说明：

乙型肝炎病毒是指引起人类急、慢性肝炎的DNA病毒，传统以检测血清感染标志物来判定HBV感染，无法对患者HBV感染复制程度作出判断。HBV-DNA定量检测技术使我们对患者体内HBV复制及传染性有更直接地了解。检出HBV-DNA是表示HBV复制的最可靠指标，HBV-DNA定量测定可以反映HBV感染者病毒复制水平，及用于HBV感染抗病毒治疗的疗效监测，也可用于肝移植患者手术后复发感染的检测。总之，乙型肝炎病毒核酸定量检测对于乙肝的准确诊断、疗效监测、及新药研制等各个方面均具有重大意义。

丙型肝炎病毒核酸定量（HCV-RNA）检测

标本类型：

1.血浆（EDTA抗凝管）

2.采集：单独采集一管静脉血，-rpm离心20min，分离血清于1.5mlEP管中，置于-20℃冰箱保存，不易反复冻融。脂血标本应4℃rpm离心15min吸取下层清亮血清。溶血标本应重新抽取血样。

检测时间：一周一次，每周五出报告

临床应用说明：

丙型肝炎病毒（HCV）是丙型肝炎的病原因子，在人群中通常经血液传播。感染后HCV病毒颗粒在宿主外周血中的含量往往较低，常规方法难以直接检测。目前临床实验室主要有两类方法：免疫学方法检测HCV抗体；分子生物学方法检测HCVRNA。检出HCVRNA是HCV感染的直接证据，是HCV复制和具传染性的最佳指标。因HCVRNA较抗HCV抗体出现早，可用于窗口期丙型肝炎病毒核酸的筛查及早期诊断。总之，血液中HCVRNA的实时RT-PCR检测已成为HCV感染诊断、丙型肝炎患者抗病毒药物治疗疗效检测及血液筛查的重要手段。

泌尿生殖道感染三项（NG/UU/CT）

泌尿生殖道感染三项（NG/UU/CT）包括：淋球菌（NG-DNA）、解脲支原体（UU-DNA）、沙眼衣原体（CT-DNA）

标本要求：

1.男性：取尿道分泌物或细小棉拭子伸入尿道约2-4cm，略捻拭子取出分泌物。将分泌物或棉拭子置入无菌管中密闭送检。如上述操作，则4℃冷藏。若中途加入生理盐水，则－20℃冷冻保存，不宜反复冻融，应采用低温运输。

2.女性：阴道：用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物，再用无菌棉拭子插入宫颈内，停5秒钟后旋动棉拭子取出宫颈分泌物，置入无菌管中密闭送检。尿道：用无菌生理盐水棉球洗尽尿道口，再用无菌棉拭子插入尿道约2cm，略捻拭子取出分泌物，置于无菌管中密闭送检。如上述操作，则4℃冷藏。若中途加入生理盐水，则－20℃冷冻保存，不宜反复冻融，应采用低温运输。

注意事项：若遇含血标本，建议重新采样。女性分泌物样本需单独采集，不能和常规检测标本混用。务必使用一次性咽拭子取样。

检测时间：一周两次，周一，周四出报告

临床应用说明：

淋病奈瑟菌（NG）简称为淋球菌，是引起淋病的病原体，人类是其惟一自然宿主。淋病奈瑟菌寄居在尿道内膜。通过对人体尿道、生殖道分泌物中淋球菌的特异性DNA核酸片段进行荧光PCR定性检测，可用于淋球菌感染引起的性传播疾病的辅助诊断。

解脲支原体是一种原核微生物，可引起泌尿生殖道感染，与女性生殖健康关系最为密切。在成人主要通过性接触传播，新生儿则由母亲生殖道分泌时感染。解脲支原体感染引起的女性生殖道器官病理性改变，是不孕不育的重要原因；解脲支原体感染孕妇还容易造成其流产；另外解尿支原体可经胎盘垂直传播或由孕妇下生殖道感染上行扩散，引起宫内感染，两者均可导致流产、早产、胎儿宫内发育迟缓、低体重儿、胎膜早破，甚至造成胎死宫内等一系列不良后果。通过对人体尿道、生殖道分泌物中解脲支原体的特异性DNA核酸片段进行荧光PCR定性检测，可用于解脲支原体感染引起的性传播疾病的辅助诊断。

沙眼衣原体也是重要的性传播疾病的病原体之一，它不仅会导致阴道、尿道感染；上行的生殖道感染还可能累及子宫内膜、输卵管和临近的盆腔结构，导致盆腔炎，输卵管损伤直至不孕。此外，此种病原体还与人乳头瘤病毒（HPV）和人类免疫缺陷病毒（HIV）的感染有关。通过对人体尿道、生殖道分泌物中沙眼衣原体的特异性DNA核酸片段进行荧光PCR定性检测，可用于沙眼衣原体感染引起的性传播疾病的辅助诊断。

手足口病毒核酸检测（EV/EV71/CA16）

手足口病毒核酸检测（EV/EV71/CA16）包括：肠道病毒通用型核酸、肠道病毒71型核酸、柯萨奇病毒16型核酸

标本要求：

咽拭子样本：采集病人发病3日内的咽拭子样本，拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉拭子置入无菌玻璃管，旋紧管盖，密闭送检。如上述操作，则4℃冷藏。若中途加入生理盐水，则－20℃冷冻保存。

检测时间：一周两次，周一，周四出报告

临床应用说明：

人类肠道病毒包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒以及新型肠道病毒共71个血清型，肠道病毒感染分布广泛，临床表现复杂多样。手足口病是由肠道病毒（以柯萨奇A组16型，肠道病毒71型多见）引起的急性传染病，多发生于学龄前儿童，尤以3岁以下年龄组发病率最高。主要症状表现为手、足、口腔等部位的斑丘疹、疱疹，少数重症病例可出现脑膜炎、脑炎、脑脊髓炎、肺水肿、循环障碍等，多由EV71感染引起，致死原因主要为重症脑干脑炎及神经源性肺水肿。通过对咽拭子肠道病毒71型及柯萨奇病毒16型的特异性RNA核酸片段进行检测，可用于临床对肠道病毒71型感染及柯萨奇病毒16型感染的辅助诊断，对于不典型症状的手足口病诊断提供一定的实验室检查依据。

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