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革兰染色基本原理

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，是由丹麦医师Gram创立，可用于标本涂片或菌落涂片，染色后细菌与环境形成鲜明的对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，从而用于临床分类鉴定。

染色结果将细菌分为革兰氏阳性菌（紫色）和革兰氏阴性菌（红色）两大类。革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，经革兰氏染色后能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，不容易被脱色液脱掉而仍呈紫色；革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过脱色液脱色后仍呈无色，再经沙黄溶液复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

操作方法

（1）涂片、固定、干燥

（2）龙胆紫液染色10秒，水洗，甩干；

（3）碘溶液染色10秒，水洗，甩干；

（3）脱色液脱色10-20秒，水洗，甩干；

（4）沙黄溶液复染10秒，水洗；

（5）待干，镜检。

染色结果

（1）我们公司自研的革兰染色液染色快速，整个染色过程只需1min；

（2）革兰阳性菌被染成紫色，革兰阴性菌被染成红色，染色对比明显；

（3）染色背景好，着色度优，染色准确率高，染色效果为优。

注意事项

涂片过厚、脱色时间不足、龙胆紫液染色时间过长有可能导致假阳性的结果；细菌涂片热固定过度、细菌培养时间太长、脱色过度等有可能导致假阴性的结果。

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