支原体检测对于日常实验的重要性

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什么是支原体:支原体是细胞外生存的最小微生物,是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.2~0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝形、分枝状等多种态。1、支原体存在于我们周围,他可能就如尘埃一样存在于我们的环境中2、可透过一般的滤膜,所以不要寄希望于过滤可以清楚支原体污染的液体支原体对培养细胞的污染发生率高,据估计平均发生率在60%左右。同时又非常隐秘,早期不容易被发现,除非用特异性和灵敏度都非常高的检测试剂盒。支原体因为个头小,能穿过0.22微米滤器,并且在实验室内会潜在的扩散。支原体污染使得用被污染的细胞样本做的实验完全失去意义和价值。因此,有必要对所有新带入的细胞培养基和新引进的细胞和细胞株(如从细胞库购置)进行支原体检测。推荐采用两种方法进行检测。可从以下三种方法中进行挑选:PCR方法,间接染色法,琼脂和肉汤培养法,花费时间是从1天到3-4周。这种检测应成为每个细胞培养或组织培养实验室进行自我质量监控的必要组成部分。工作原理「首次治疗液Mynox」是全球惟一一款直接杀除支原体的专利试剂。它来自枯草杆菌提取物,可特异性地与支原体膜结合,改变支原体膜通透性,从而使支原体在2-3小时内破溃死亡。「巩固防护液」加入培养基,后续培养一个月,细胞将会彻底清除支原体的污染,确切有效。(3管「巩固防护液」可传3代)特点1)快速、有效。针对无法长期培养的珍贵样本,使用Mynox处理细胞3小时左右,即可彻底祛除支原体。2)不含抗生素,不会诱导支原体耐药。注意:Mynox处理后的细胞由于支原体破溃,此时做支原体PCR检测,会呈强阳性。建议传代3-4次以后,再做PCR检测,此时会呈阴性。



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