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细菌耐药性检测对准确掌握细菌对抗菌药物的耐药动向和耐药性变迁,并指导临床合理用药具有重要的意义。
近年来抗菌药物的广泛应用,引起了耐药菌株的大量产生。但新的抗感染药品问世速度远赶不上细菌变异产生的耐药性速度。还有新发传染病及其病原体的不断涌现。而细菌耐药性检测过程就是将细菌接种到不同浓度的药物上,测定其最小抑制浓度,即MIC值。
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乌梅抗菌作用有许多报道,年山东医学院微生物教研组报道,50%乌梅水煎剂对金黄色葡萄球菌有抑制作用;年中国医学科学院药物研究所报道,%乌梅水煎剂对金黄色葡萄球菌的抗菌作用最强;乌梅对脑膜炎球菌的抑菌环为20mm;年周氏等报道,乌梅对淋球菌的抑菌环为17~26mm;年又报道对小肠结肠炎耶氏菌的抑菌环为≥27mm。上述报道大多为定性实验,一般使用1株菌株,所使用培养基也多为营养琼脂,所以其结果往往缺乏代表性。
为此,观察乌梅对临床菌株的抑菌效果。应采用琼脂稀释法,对乌梅进行株临床菌株的抑菌活性检测。
乌梅对株临床菌株的抑菌效果实验
(1)药液稀释
排列无菌试管10只,于2~10只管中加无菌蒸馏水10mL,取50%(1∶2)乌梅水煎液20mL,于第一管加入10mL,第2管加入10mL,于第2管混合后取出10mL,加入第3管,再混合后取10mL放入第4管,如此连续稀释至第9管取出10mL弃掉。第10管只有无菌蒸馏水作对照。这样1~9管中含有不同浓度药液各10mL。
(2)含药平板制备
将已溶化的无菌M-H琼脂mL分装于10瓶,每瓶90mL,将第1管含10mL50%的乌梅水煎液放入含90mL培养基的瓶中,混合后倾注4个平板,每个平板含25mL含药琼脂,第2管以后的平板制备同第1管,凝固后备用。
(3)菌液制备
将金黄色葡萄球菌等新鲜培养物(菌落)制成菌液,浓度相当于0.5麦氏比浊管。
(4)指标检测
用多点接种仪分别吸取各种菌液并将其点种于含不同药物浓度琼脂平板上。于35℃培养18~24h,观察最低抑菌浓度。
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细菌多点接种仪
恒奥科技自主研发的HMI-60多点种仪为细菌耐药性实验-琼脂稀释法专用仪器,可以在9秒钟内自动进行并完成接种,打破了传统人工接种模式,采用机械接种,使接种过程简单、快速,准确。
1.接种棒使用经特殊处理的不锈钢制成,由于专门的结构设计和特殊加工,消除了接种棒的疏水性并防止了采样时菌液滴落。
2.具有位置判定针,培养皿上的菌落位置很容易判定,灭菌处理方法简单。
3.接种速度极快,减轻工作强度并避免操作误差。
4.采菌液量准确重现性高,可靠性高的检测手段,采菌量准确确保所有接种棒在培养皿上成功接种。
5.操作简单快速接种速度快且可调,实现了快速检测菌液稀释的简易操作,减轻工作强度并避免操作误差。
6.独特的可调速旋转式样品托盘可实现自动定位无需操作只需要更换样品即可完成接种,极大的缩短了操作时间,满足了实验室自动化的要求。
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恒奥科技
专注实验室样品前处理
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