中食标准技术信息网（ 常见的需氧革兰阳性杆菌有棒状杆菌属、芽胞杆菌属、李斯特菌属、丹毒丝菌属、加特纳菌属。一、棒状杆菌属 棒状杆菌属是一群革兰阳性杆菌，一端或两端膨大呈棒状，故名棒状杆菌。本菌着色不匀，有异染颗粒。能分解一些糖类，产酸不产气。本属细菌种类较多，有白喉棒状杆菌、假白喉棒状杆菌、干燥棒状杆菌、溃疡棒状杆菌等。引起人类致病的主要是白喉棒状杆菌，其他大多数为条件致病菌。
（一）白喉棒状杆菌1.生物学特征 （1）形态与染色：菌体细长微弯，一端或两端膨大的革兰阳性。细菌排列呈散在L、V、Y字形及不规则栅栏状。在细菌的一端或两端有浓染的颗粒，称为异染颗粒。用Neisser（奈瑟）染色，菌体染成黄褐色，颗粒被染成紫黑色。 （2）培养特性：1）血液琼脂平板；2）吕氏（Loeffler）血清斜面培养基：生长迅速，10～18h形成灰白色、湿润、S型菌落。涂片染色形态典型，异染颗粒明显；3）亚碲酸钾血琼脂：本菌能吸收亚碲酸盐，并使其还原为元素碲，使菌落呈黑色； 生化反应：本菌能分解葡萄糖、麦芽糖、果糖、半乳糖，产酸不产气。不分解乳糖，极少分解蔗糖。能还原硝酸盐，不液化明胶，不产生吲哚，不分解尿素。 根据亚碲酸钾血琼脂培养基生长特，可将本菌分为轻、中、重三型。在我国以轻型多见。分型与所致疾病的严重程度无关，可用于流行病学调查。
2.致病性 白喉棒状杆菌引起白喉，多在秋冬季节流行。 本菌一般不侵入血流，但其产生的大量外毒素可吸收入血，引起毒血症。毒素能与敏感的心肌，肝、肾、肾上腺等组织细胞及外周神经，尤其与支配咽肌和腭肌的神经结合，引起细胞变性、坏死、内脏出血和神经麻痹等严重损害。3.微生物检验 （1）标本采集：用无菌长棉拭子，从可疑的伪膜边缘采集分泌物，未见伪膜的疑似患者或带菌者可采集鼻咽部或扁桃体黏膜上的分泌物。若需培养，应在采集双份标本。如不能立即送检，应将标本浸于无菌生理盐水或15%甘油盐水中保存。
（2）检验方法及鉴定1）直接镜检：将标本涂于2～3张载玻片上，分别作革兰染色和异染颗粒染色（奈瑟法）。镜检如见革兰阳性形态典型的棒状杆菌，并有明显的异染颗粒，可初步报告“检出形似白喉棒状杆菌”。2）分离培养：①吕氏血清斜面：本菌在此培养基上生长较标本中的杂菌迅速，于35℃培养8～12h后，即形成灰白色的菌落，而其他杂菌则尚未形成菌落。②亚碲酸钾血琼脂平板：若在亚碲酸钾血琼脂平板上菌落典型，而吕氏血清斜面培养阴性，也可报告阳性；若两者均为阴性，必须观察72h后方可作出报告。 （3）生化反应：主要用于鉴别白喉棒状杆菌与类白喉棒状杆菌。 （4）毒力试验：可作为鉴定致病菌株的重要依据。试验方法分体外法和体内法两大类。体外法有双向琼脂扩散法（琼脂平板毒力试验）、SPA协同凝集试验、对流免疫电泳；体内法可用豚鼠作毒素中和试验。
（二）其他棒状杆菌 棒状杆菌除白喉棒状杆菌外，其余统称为类白喉棒状杆菌。此类细菌种类多，一般无致病性或仅能与其他化脓细菌产生混合感染，有的可能为条件致病菌。临床标本中较常见的类白喉杆菌有溃疡棒状杆菌、假白喉棒状杆菌、干燥棒状杆菌、溶血棒状杆菌、化脓棒状杆菌等。
二、芽胞杆菌属 芽胞杆菌属是一大群有芽胞的革兰阳性大杆菌。广泛分布于空气、土壤、尘埃及腐烂物中，绝大多数为腐生菌，许多菌种成为实验室等环境的污染菌。少数寄生于动物或昆虫并对人类及动物致病，其中炭疽杆菌是人畜共患的重要致病菌，蜡样芽胞杆菌能致食物中毒。还有枯草芽胞杆菌、环状芽胞杆菌等，偶可引起败血症、脑膜炎及肺炎等。 （一）炭疽芽胞杆菌 炭疽芽胞杆菌主要引起食草动物患炭疽病，也可经一定途径感染人类，为人畜共患传染病。
1.生物学特性 （1）形态与染色：是致病菌中最大的革兰阳性杆菌，呈竹节状。机体内或含血清培养基上可形成荚膜。人工培养或在外界环境中易产生芽胞，形状椭圆，位于菌体中央，其直径小于菌体。 （2）培养特性：在琼脂平板上经35℃，18～24h培养后，形成灰白色、不透明、无光泽、边缘不整齐、大而扁平的粗糙型菌落，在低倍镜下观察，呈卷发状。有毒株在碳酸氢钠琼脂平板上，置于5%CO2环境中37℃培养24h后，形成黏稠、有光泽的黏液型（M型）菌落，这是有荚膜的菌体构成的。 炭疽杆菌的卷发样菌落
（3）生化反应：分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气。不分解乳糖，不产生靛基质及H2S。能迟缓液化明胶，沿穿刺线向四周扩散，形如倒松树状。 （4）抗原构造：抗原包括：①菌体多糖抗原；②荚膜多肽抗原；③芽胞抗原；④炭疽毒素抗原。 （5）本菌芽胞体抵抗力很强，在干燥土壤或皮毛中常温下可存活数十年。2.致病性 炭疽芽胞杆菌可经皮肤、呼吸道和胃肠道侵入机体引起炭疽病。临床类型有皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽，病死率很高。
3.微生物检验 （1）标本采集：皮肤炭疽取病灶分泌物；肺炭疽采取痰液；肠炭疽采取粪便；炭疽脑膜炎采取脑脊液；各型炭疽均可采取血液。 （2）检验方法及鉴定：炭疽杆菌的检查要特别注意芽胞型的实验室感染，故应有专门防护的实验室，并对用过的器具、检材等进行严格的消毒处理。1）直接镜检：将可疑材料涂片，组织标本可作压印片，用1：的升汞固定5min，再行革兰染色和荚膜染色。镜检发现有荚膜的革兰阳性竹节状大杆菌，可初步诊断。2）分离培养：一般标本接种血平板，37℃培养维持24h后观察菌落特点。污染严重的标本可预先加热至65℃30min杀灭杂菌，或接种炭疽杆菌选择培养基—戊烷脒血琼脂平板，培养时间稍长，菌落特征与血平板培养基的生长相似，但菌落较小。为提高检出效果，可选用2%兔血清肉汤增菌，然后分离培养。3）动物试验：将标本或培养物制成悬液，皮下接种于豚鼠（1ml）或小白鼠（0.2ml）。均可引起败血症，并于1～3d后死亡。内脏和血液中存在大量有荚膜的细菌。
4）鉴定试验：①串珠试验：炭疽芽胞杆菌在0.05～0.5IU青霉素/ml的肉汤培养基中，可形成圆球形并相连如串珠状；②噬菌体裂解试验；③毒力试验：将待检菌接种于含0.5%碳酸氢钠和10%马血清琼脂平板上，置10%CO2环境下，37℃培养24～48h，有毒力的炭疽芽胞杆菌能形成荚膜，菌落呈M型。5）判定标准：革兰阳性、两端平整、竹节状成双或呈短链排列，有荚膜之粗大杆菌，或荚膜肿胀试验阳性，串珠试验阳性；重碳酸盐毒力试验出现M型菌落可作出诊断。
（二）蜡样芽胞杆菌1.生物学性状及临床意义 G+大杆菌，芽胞位于菌体中心或次末端不突出菌体。呈链状排列。菌落表面粗糙似融蜡状，故名蜡样杆菌。食入被大量蜡样杆菌污染的食物后可致食物中毒：腹泻型、呕吐型。2.微生物检验 除作分离培养外，细菌计数对本菌所致食物中毒有诊断价值，因暴露于空气中的食品均在一定程度上受本菌污染。
三、产单核李斯特菌 属于李斯特菌属。该属包括8个种，主要包括产单核李斯特菌、格氏李斯特菌和默氏李斯特菌，其中只有产单核李斯特菌对人有致病性。 （一）生物学特性1.形态染色菌体常呈V字形或成对排列，偶呈丝状。有鞭毛、无芽胞，20℃有动力，37℃动力缓慢，一般不形成荚膜。幼龄菌呈革兰阳性，陈旧培养物多转为革兰阴性。2.培养特性在血琼脂平板上35℃培养8～24小时后形成小而透明的S型菌落，周围有狭窄的β溶血环。因其能生长于4℃，故可进行冷增菌。在半固体培养基中可出现倒伞形生长。通常在25℃培养时，显示有动力。3.生化反应 该菌不发酵甘露醇和木糖，硝酸盐还原阴性，CAMP阳性。可发酵多种糖类，触酶阳性，不形成吲哚，不分解尿素，能水解七叶苷。4.根据菌体及鞭毛抗原的不同，可分4个血清型，1、3、4型尚可分为若干亚型。本菌耐碱不耐酸。对热较为敏感，加热50℃10分钟可死亡。
（二）微生物检验1.标本采集 根据感染部位不同而采取相应标本。如全身感染采取血液，局部采取分泌物或脓液，感染动物则用组织匀浆。2.检验方法与鉴定 （1）分离培养：将血液或脑脊液的离心沉淀物接种两支脑心浸液培养基中。其中一支置10%CO2环境中，37℃培养24～48h；另一支置4℃培养。咽喉拭子、组织及粪便接种于肉汤培养基中，置4℃培养，进行冷增菌。从血平板上挑取β溶血环的菌落，做涂片染色镜检并进一步鉴定。 （2）鉴定：本菌可根据下列特点加以确定：在血琼脂上有狭窄的β溶血环，25℃动力最强，在半固体培养基上呈倒伞状生长，可在4℃冷增菌生长，木糖、甘露醇和H2S阴性。CAMP（与金黄色葡萄球菌协同溶血）阳性。触酶阳性。
四、阴道加特纳菌 新鲜标本分离菌株趋向革兰染色阳性，保存菌株趋向革兰染色阴性。本菌无芽胞、无荚膜、无鞭毛，多形性。 本菌营养要求较高，在5%人血平板上，在3%～5%CO2、35℃环境中培养48h，可形成针尖大小菌落，在人血和兔血平板上可出现β溶血环。 引起非淋菌性阴道炎的主要病原菌之一。五、丹毒丝菌属 红斑丹毒丝菌为革兰阳性杆菌，单个存在或形成短链。在血琼脂平板上可形成两种菌落。光滑型菌落细小、圆形、突起有光泽；粗糙型菌落大，表面呈颗粒状。厌氧或微需氧菌，初次分离要在厌氧环境中培养。无芽胞、无鞭毛、无荚膜。触酶阴性。48h发酵葡萄糖、乳糖，产酸不产气。对湿热及化学消毒剂敏感。 红斑丹毒丝菌引起红丹毒丝病，主要发生在动物身上，人类也可感染发病，主要因接触动物或其产品经皮肤损伤而引起类丹毒。以局部感染为主，全身感染者少见。 本菌对青霉素、头孢菌素、红霉素和四环素等药敏感。
习题 牙关紧闭和角弓反张是何种细菌感染所出现的症状 A.肉毒梭菌 B.破伤风梭菌 C.霍乱弧菌 D.鼠疫耶尔森菌 E.炭疽杆菌
『正确答案』B『答案解析』牙关紧闭和角弓反张是破伤风梭菌感染所出现的症状。
产气荚膜梭菌可产生多种外毒素，其中最重要的是 A.α毒素 B.β毒素 C.γ毒素 D.κ毒素 E.ε毒素
『正确答案』A『答案解析』产气荚膜梭菌可产生多种外毒素，其中最重要的是α毒素。
关于肉毒梭菌特点不正确的是 A.肉毒毒素是毒性最强的毒素 B.肉毒毒素阻止胆碱能神经末梢释放乙酰胆碱 C.食入含肉毒毒素的食物引起中毒 D.革兰染色阳性，形成芽胞，有荚膜 E.肉毒中毒死亡率高
『正确答案』D『答案解析』革兰染色阳性，形成芽胞，没有荚膜。
脓胸患者，怀疑厌氧菌感染，抽取脓汁应如何运送 A.注入无菌试管内 B.针筒运送 C.注入血培养瓶内 D.注入无菌小瓶内 E.用无菌拭子蘸取后放到增菌管内
『正确答案』B『答案解析』厌氧菌感染，抽取脓汁针筒运送。
引起假膜性肠炎的病原体是 A.双歧杆菌 B.消化链球菌 C.艰难梭菌 D.大肠埃希菌 E.白色念珠菌
『正确答案』C『答案解析』引起假膜性肠炎的病原体是艰难梭菌。
对气性坏疽病原早期诊断有价值的是 A.直接镜检 B.动物试验 C.汹涌发酵试验 D.分离培养 E.Nagler试验
『正确答案』A『答案解析』对气性坏疽病原早期诊断有价值的是直接镜检。
芽胞呈网球拍状的细菌是 A.破伤风芽胞梭菌 B.产气荚膜梭菌 C.炭疽杆菌 D.肉毒梭菌 E.嗜血杆菌
『正确答案』D『答案解析』芽胞呈网球拍状的细菌是肉毒梭菌。
厌氧菌感染的危险因素不包括 A.组织缺氧或氧化还原电势低 B.机体免疫功能下降 C.长期应用抗菌药物 D.紫外线照射 E.深部需氧菌感染
『正确答案』D『答案解析』紫外线照射不是厌氧菌感染的危险因素。
在牛乳培养基中出现汹涌发酵现象的细菌是 A.产气荚膜梭菌 B.肉毒梭菌 C.破伤风梭菌 D.艰难梭菌 E.以上都可
『正确答案』A『答案解析』在牛乳培养基中出现汹涌发酵现象的细菌是产气荚膜梭菌。
破伤风芽胞梭菌的重要致病条件是 A.机体无免疫力 B.菌群失调 C.需氧菌污染伤口 D.伤口局部形成厌氧环境 E.破伤风芽胞梭菌进入血液
『正确答案』D『答案解析』破伤风芽胞梭菌的重要致病条件是伤口局部形成厌氧环境。
血平板上能产生双溶血环的细菌是 A.产气荚膜梭菌 B.肉毒梭菌 C.炭疽杆菌 D.白喉杆菌 E.鼠疫杆菌
『正确答案』A『答案解析』血平板上能产生双溶血环的细菌是产气荚膜梭菌。
Nagler反应原理是产气荚膜梭菌 A.分解葡萄糖产酸产气 B.分解乳糖产酸产气 C.分解蛋黄中的卵磷脂 D.分解含硫氨基酸产生硫化氢 E.液化明胶
『正确答案』C『答案解析』Nagler反应原理是产气荚膜梭菌分解蛋黄中的卵磷脂。
测定白喉杆菌是否产生毒素可根据 A.形态染色特点，特别是异染颗粒 B.吕氏血清斜面上快速生长的特点 C.亚碲酸钾血琼脂培养基上菌落的特点 D.Elek平板毒力试验 E.Schicktest
『正确答案』D『答案解析』Elek平板毒力试验是用于测定白喉杆菌是否产生毒素。
厌氧培养厌氧状态指示剂常用 A.伊红 B.亚甲蓝和刃天青 C.溴甲酚紫 D.碱性复红 E.结晶紫
『正确答案』B『答案解析』厌氧培养厌氧状态指示剂常用亚甲蓝和刃天青。
人类最常见的炭疽病是 A.肺炭疽 B.肠炭疽 C.炭疽败血症 D.脑炭疽 E.皮肤炭疽
『正确答案』E『答案解析』人类最常见的炭疽病是皮肤炭疽。
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